瑞氏染色原理及作用

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瑞氏染色原理：

    瑞氏染料是由堿性染料美藍(lán)（ Methvlem blue ）和酸性染料黃色伊紅（ Eostm Y ）合稱伊紅美藍(lán) 染料即瑞氏 （美藍(lán)－伊紅Y）染料。伊紅鈉鹽的有色部分為陰離子，無色部分為陽離子，其有色部分為酸性，故稱伊紅為酸性染料。美藍(lán)通常為氯鹽是堿性的，美藍(lán)的中間產(chǎn)物結(jié)晶為三氯化鎂復(fù)鹽，其有色部分為陽離子，無色部分為陰離子，恰與伊紅鈉鹽相反。

    為了觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，識別各種細(xì)胞及其異常變化，血涂片必須進(jìn)行染色。瑞氏染色法是血細(xì)胞分析最經(jīng)典和最常用的染色法。 細(xì)胞的各大種成分均由蛋白質(zhì)構(gòu)成，由于蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)，所帶正電荷的數(shù)量隨溶液pH而定。對某一蛋白質(zhì)而言，如環(huán)境pH<pI，（pI為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)），則該蛋白質(zhì)在酸性環(huán)境中正電荷增多，易與伊紅結(jié)合，染色偏紅；相反，當(dāng)環(huán)境的pH>pI，即在堿性環(huán)境中負(fù)電荷增多，易與美藍(lán)結(jié)合，染色偏藍(lán)。臨床上常用緩沖液（pH6.4～6.8）來調(diào)節(jié)染色時的pH值，同時還應(yīng)注意使用清潔、中性的玻片，優(yōu)質(zhì)的甲醇配制染液，以期達(dá)到滿意的染色效果。

    瑞氏染色的染料配方濃度對細(xì)胞核著色程度適中,細(xì)胞核結(jié)構(gòu)和色澤清晰艷麗,對核結(jié)構(gòu)的識別較佳,但對胞漿著色偏酸,色澤偏紅,對細(xì)胞漿內(nèi)顆粒特別是嗜天青顆粒及嗜中性顆粒著色較差。

    瑞氏染液染色鑒定

    瑞氏或姬姆薩染色液鑒定：剛配好或放置一個月以上的染液可進(jìn)行下列鑒定：

    1．取1滴染液于乳白玻板上，自行迅速擴(kuò)散開，其顏色變紫紅色，且有偽足形成。

    2．取1滴染液加1滴緩沖液，染液由深藍(lán)色立即變?yōu)樽霞t色。

    3．取血片或骨髓片進(jìn)行試染檢查，觀察染色后各類細(xì)胞的胞核、胞漿及顆粒著色情況，pH是否合適及染色合適時間。如有上述變化，表明染液合格，可供使用。

    以上為瑞氏染色原理，瑞氏染色是目前最常用而又最簡單的染色方法。瑞氏試劑中之酸性伊紅和堿性美藍(lán)混合經(jīng)化學(xué)作用后，變成中性之 伊紅化美藍(lán)，久置后，經(jīng)氧化而含有天青。此三種染料分別和細(xì)胞核及漿中的NH3 和COO-等結(jié)合，使細(xì)胞核及胞漿著色。由于系中性染料，又有緩沖液調(diào)節(jié)酸堿度，所以細(xì)胞受染后，藍(lán)紅等顏色都較適中，核染質(zhì)、胞漿及其中之顆粒顯色較為清楚。

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